ICS 11.220 CCS B 41 云 53 南 省 地 方 标 准 DB53/T 1064.2—2021 绿孔雀检疫技术 第 2 部分：禽流感病毒 实验室检测技术规范 Quarantine technique for Pavo muticus —Part 2: Technical specifications for laboratory examination of Avian Influenza Virus 2021 - 09 - 30 发布 云南省市场监督管理局 2021 - 10 - 14 实施 发 布 DB53/T 1064.2—2021 目  次 前言..................................................................................................................................................................... III 引言..................................................................................................................................................................... Ⅴ 1 范围................................................................................................................................................................. 1 2 规范性引用文件.............................................................................................................................................1 3 术语和定义..................................................................................................................................................... 1 4 缩略语............................................................................................................................................................. 2 5 总则................................................................................................................................................................. 2 6 禽流感病毒毒株的毒力划分和血清亚型.................................................................................................... 2 7 仪器设备和试剂.............................................................................................................................................3 7.1 7.2 8 样品................................................................................................................................................................. 3 8.1 8.2 8.3 9 采样要求与原则......................................................................................................................................3 采样类型和采样方法..............................................................................................................................3 样品储运..................................................................................................................................................4 试验步骤......................................................................................................................................................... 4 9.1 9.2 9.3 9.4 9.5 9.6 10 实验室器材..............................................................................................................................................3 试剂.......................................................................................................................................................... 3 样品制备..................................................................................................................................................4 鸡胚接种..................................................................................................................................................4 MDCK 细胞培养.....................................................................................................................................4 病毒血凝（HA）试验和血凝抑制（HI）试验................................................................................... 5 逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）扩增检测...................................................................................5 H 蛋白序列分析......................................................................................................................................7 试验数据处理...............................................................................................................................................7 10.1 HA 试验结果判定................................................................................................................................. 7 10.2 HI 试验结果判定...................................................................................................................................7 10.3 核酸检测结果判定................................................................................................................................8 附录 A（规范性） 缓冲溶液和 1%鸡红细胞悬液........................................................................................ 9 附录 B（资料性） 采样记录表......................................................................................................