SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T1239—2015 代替SN/T1239—2003 国境口岸霍乱检验规程 Examination codes for cholera at frontier port 行业标准信息服务平台 2015-02-09发布 2015-09-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T1239—2015 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准代替SN/T1239—2003《国境口岸霍乱检验规程》。 本标准同SN/T1239—2003相比，主要技术变化如下： 调整了规范性引用文件； 一在6.2实验室检验中明确了菌株复核鉴定的试验； 在7检验结果报告中修改了报告方式； 一在附录A.1设备和材料中增加了全自动微生物生化鉴定系统、弧菌显色培养基； 参考SN/T3064.1，在附录A.3样本的处理中增加了媒介生物样本的处理内容； 依据WS289，在附录A.4中增加了快速辅助检验方法； 调整了部分附录A.5.2的内容，附录A.5.2.2中增加了弧菌显色培养基内容，依据WS289主 要针对复核菌株增加了附录A.6.5.3系统生化试验； 附录C修改为规范性附录； 一在附录C.2聚合酶链反应（PCR）法测霍乱肠毒素（CT）基因中，依据SN/T1872增加了1对 ctxA引物，补充了对照的设置，并调整了部分描述内容； 删除了参考文献和原附录C中家兔小肠肠段结扎试验检验霍乱肠毒素 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国珠海出境检验检疫局、中华人民共和国四川出人境检验检疫 局、中华人民共和国云南出人境检验检疫局。 本标准主要起草人：杨泽、史咏梅、莫秋华、陈肖萧、谭华、梁玉英、罗忠鑫、李卫岗、叶立青。 本标准所代替标准的历次版本发布情况为：SN/T1239—2003。 行业标准信息服务平台 1 SN/T1239—2015 国境口岸霍乱检验规程 1范围 本标准规定了国境口岸霍乱检验的对象、样本采集、检验程序、结果报告及阳性结果的处置。 本标准适用于出人境检验检疫机关在国境口岸对01群和0139群霍乱弧菌的检验。 2 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 4789.1 食品安全国家标准食品微生物学检验总则 GB 4789.28 食品安全国家标准食品微生物学检验 培养基和试剂质量要求 GB 15984 霍乱诊断标准及处理原则 GB 19489 实验室生物安全通用要求 SN/T 1297 国境口岸霍乱疫情监测规程 SN/T 1872 出人境口岸霍乱弧菌多重聚合酶链反应操作规程 SN/T 1876 医学媒介生物标本采集、制作及保存规程 SN/T2332 国境口岸霍乱弧菌的荧光PCR检测方法 3术语和定义 下列术和定义适用于本文件。 3.1 霍乱cholera 本标准指01群和0139群霍乱弧菌引起的急性肠道传染病，是发病急、传播快、波及面广、危害严重 标准信息服 的甲类传染病。 4对象 4.1元 霍乱感染或疑似感染病例的排泄物、呕吐物。 4.2被霍乱弧菌污染或有霍乱弧菌污染嫌疑的交通工具、行李、货物、集装箱、邮包、水产品、食品、饮用 水、压舱水、污水、餐饮用具、生活用品。 4.3其他国境口岸环境样本，蝇及董样本。 5样本采集、运送与保存 5.1粪便和呕吐物样本采集 5.1.1粪便样本采集 采集排出的新鲜大便于灭菌容器中，水样粪便采集1mL~3mL，成形粪便采集1g~3g（为保证粪 1 SN/T 1239—2015 便样本在运送过程中不变干，可在盛装标本的容器中加人几滴灭菌生理盐水）；亦可用已湿润的直肠棉 拭，由肛门插人直肠内3cm～5cm处并轻轻旋转，确保退出的棉上有可见的粪便，把棉拭放人灭菌 容器中。粪便样本宜在发病早期（发病4d内），服用抗菌药物之前采集。 5.1.2呕吐物样本采集 采集自然呕吐的呕吐物于灭菌容器中，水样呕吐物采集1mL~3mL，非水样呕吐物采集1g~3g。 5.1.3沾有粪便、呕吐物的物体样本采集 沾有粪便、呕吐物的衣物或其他物体、户体的肠内容物样本的采集，按5.1.1、5.1.2的规定或按5.4的 规定执行。所采样本的传递保存方式按5.6.3的规定。 5.2水样采集 5.2.1直接采集法 用灭菌容器采集水样。饮用水、压舱水用灭菌容器采集500mL样本；江、湖、河、海、塘或井水则采 集岸边20cm深度以内的表层水500mL，放于灭菌容器中。采集的水样宜尽快（3h内）送到实验室。 不能在3h内送检的，宜在采水点将50mL10倍浓缩碱性蛋白陈水加人450mL水样中，混匀 5.2.2纱布块集菌法 用中心系有1m以上线绳的20cm×20cm灭菌脱脂纱布块放在采水点的水中，将线绳固定于岸 边物体上，放置过夜（16h～24h），次日将吸着水（约18mL）的纱布块放人灭菌容器中送实验室。 5.3食品样本采集 5.3.1各种食品的样本采集方法按GB4789.1的规定 5.3.2如被采集的食品样本量小于25g时，可有多少采集多少；也可按5.4的规定采集。 5.4牛 物体表面样本的采集 用灭菌棉拭蘸以碱性蛋白陈水涂抹可疑部位，置于灭菌容器中，所采样本的传递保存方式按5.5.3的 标准信息服 规定。食品样本采集也可按此方法。 5.5蝇及蛋样本采集 蝇及董样本采集按照SN/T1876执行。 5.6样本运送与保存 和保存。实验室收到的样本一般宜当天做到直接分离或/和增菌后分离。如样本还需用于其他病原体 检验，可依据其他病原体检验样本的保存运送方式，建议可在8℃以下保存运送。 5.6.2不能于当天进行检验的样本，如样本需冷冻，宜一18℃保存；如样本需冷藏，可选择4℃～8℃ 月以上，宜在一30℃以下冷藏。 5.6.3采集的粪便或呕吐物样本不能立即送检时（3h内），宜根据运送时间，选择样本传递保存方式。 如运送时间小于8h，将样本放人碱性蛋白陈水中传递。如运送时间大于8h，将样本放人Cary-Blair二 氏培养基中传递，带有样本的棉拭宜完全地插入Cary-Blair二氏培养基底部。用棉拭转移样本时，棉拭 2