SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 1135.11—2013 马铃薯皮斑病菌检疫鉴定方法 Detection and identification of Polyscytalum pustulans (M.N.Owen et Wakef.) M.B.Ellis 行业标准信息服务平台 2013-11-06发布 2014-06-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 行业标准信 中华人民共和国出人境检验检疫 行业标准 SN/T 1135.11—2013 * 中国标准出版社出版 北京市朝阳区和平里西街甲2号（100013） 北京市西城区三里河北街16号（100045） 总编室：（010)64275323 网址www.spc.net.cn 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷 * 开本880×12301/16 印张0.75 字数16千字 2014年4月第一版 2014年4月第一次印刷 印数1—1600 * 书号：155066·2-26930 定价16.00元 SN/T 1135.11—2013 前言 本部分按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本部分起草单位：中国检验检疫科学研究院。 本部分起草人：吴品珊、杜洪忠、严进、张秋娥。 行业标准信息服务平台 SN/T 1135.11—2013 马铃薯皮斑病菌检疫鉴定方法 1 范围 SN/T1135的本部分规定了马铃薯皮斑病菌的检疫鉴定方法。 本部分适用于马铃薯块茎上马铃薯皮斑病菌的检疫和鉴定。 2病菌的基本信息 中文名：马铃薯皮斑病菌 英文名：Skinspotofpotato 学名:Polyscytalumpustulans(M.N.Owen et Wakef.)M.B.Ellis 异名:Oospora pustulans M.N.Owen &Wakef. 分类地位：真菌界（Fungi），有丝分裂孢子真菌（Mitosporicfungi），蛇孢霉属（Polyscytalum）。 传播途径：病菌的初侵染源是块茎，病菌孢子可以通过雨水、灌溉近距离传播，远距离通过种薯或带 病土壤进行传播。 马铃薯皮斑病菌的其他信息参见附录A。 3方法原理 业标准信 4仪器和用具 4.1仪器 生物显微镜（具测量功能），体视显微镜，超净工作台，生物培养箱天平，高压灭菌锅，台式高速离心 机，pH计，水浴箱，实时荧光PCR扩增仪。 4.2用具 烧杯，三角瓶，量筒，试管，培养皿，酒精灯，镊子，剪刀，解部刀，接种针，载玻片，盖玻片，塑料研杆， 移液器，移液器吸头，离心管，液氮罐。 5试剂和培养基 5.1试剂 葡萄糖，琼脂粉，液氮，Tris-HCl,MgCl²,HCl,EDTA,NaOH,NaOAC,KCl,Tris,CTAB,TAE,无 水乙醇（Ethanol），SYBRGreenI核酸染料，氯仿（Chloroform），异丙醇（Isopropanol），异戊醇（Isoamyl alcohol)，蛋白酶K，TaqDNA聚合酶，dNTP，通用引物ITS5和ITS4，实时荧光PCR特异性引物 PpustF1、PpustR2及探针PpustPrl。 1