SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T 2600—2010 出境水杉遗传种质资源快速鉴定方法 Methods for the rapid identification of Metasequoiaglyptostroboides genetic resources for export 行业标准信息服务平台 2010-05-27发布 2010-12-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T2600—2010 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准负责起草单位：中华人民共和国湖北出人境检验检疫局 本标准参加起草单位：湖北林业科学院。 本标准主要起草人：李金甫、蔡三山、王振华、陈京元、邱国强、靳勇。 行业标准信息服务平台 SN/T.2600—2010 引言 珍稀植物遗传物种是大自然留给我们的宝贵财富，也是世界各国争夺的珍稀资源。出入境检验检 疫机构作为生物物种资源进出境查验的执法部门，迫切需要准确、快速的生物物种鉴定技术，提高口岸 查验工作的效率，切实保护我国生物物种资源。 本标准应用分子生物学技术，通过有关资料的收集和实验室检测验证，建立了国家一级重点保护植 物水杉（Metasequoiaglyptostroboides）的准确、快速的鉴定方法，解决对水杉实施口岸查验的关键技术 问题，提高查验效率，有效避免水杉遗传种质资源的流失。 行业标准信息服务平台 SN/T2600—2010 出境水杉遗传种质资源快速鉴定方法 1范围 本标准规定了水杉（Metasequoiaglyptostroboides）遗传种质资源的鉴定方法。 本标准适用于在对出境水杉遗传种质资源进行查验时，对其进行鉴定 2术语、定义和缩略语 2.1术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2.1.1 内转录间隔区 internal transcribed spacer,ITS 植物细胞核中，编码rRNA的基因是一些高度重复序列组成的多基因家族，其中，编码核糖体小亚 基rRNA的18S基因与5.8S、26S基因共同构成一转录单位（见图1）。其中，5.8S与18S、26S间的基 因间区分别为内转录间隔区（ITS)1和2。亦即，ITS区被5.8S分隔成ITS1和ITS2两个区域。ITS1 和ITS2的转录物在rRNA加工的过程中被切掉，但这两部分在核rRNA成熟过程中具有重要作用。 18s Nuclear rDNA 5. 8s rDNA ISLI ITS2 26s Nuclear DNA ITSRegion 图1ITS 区域结构 2. 1. 2 聚合酶链式反应 polymerase chain reaction,PCR 模板DNA序列经高温变性成为单链，在DNA聚合酶作用和适宜的反应条件下，根据模板DNA 序列设计的两条引物分别与模板DNA两条链上相应的一段互补序列发生退火而相互结合，接着在 DNA聚合酶的作用下以四种脱氧核糖核酸（dNTP）为底物，使引物得以延伸，然后不断重复变性、退火 和延伸这一循环，使欲扩增的基因片段以几何倍数扩增。 2.2缩略语 下列缩略语适用于本文件。 2. 2. 1 DNAdeoxyribonucleic acid 脱氧核糖核酸。 2. 2. 2 dNTPdeoxyribonucleoside triphosphate 脱氧核苷酸三磷酸。 2.2. 3 dATPdeoxyadenosinetriphosphate 脱氧腺苷三磷酸。 1