SN 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T4448—2016 皮革材料中异噻唑啉酮防霉剂的 含量测定 Determination of isothiazolinone fungicides content in leather material 行业标准信息服务平台 2016-03-09发布 2016-10-01实施 中华人民共和国 发布 国家质量监督检验检疫总局 SN/T4448—2016 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位：中华人民共和国福建出人境检验检疫局、中华人民共和国四川出人境检验检 疫局。 本标准主要起草人：毛树禄、张元金、陈斌、俞凌云、尹洪雷、连小彬、李小娅。 行业标准信息服务平台 1 SN/T4448—2016 皮革材料中异噻唑啉酮防霉剂的 含量测定 1范围 本标准规定了皮革中2-甲基异噻唑啉-3-酮（MI）、5-氯-2-甲基异噻唑啉-3-酮（CMI)和1,2-苯并异 噻唑-3-酮（BI)等三种异噻唑啉酮的HPLC-DAD测定方法， 本标准适用于皮革及其制品中2-甲基异噻唑啉-3-酮（MI）、5-氯-2-甲基异噻唑啉-3-酮（CMI）和 1,2-苯并异噻唑-3-酮（BI)等三种异噻唑啉酮含量的测定。 2 2规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法（ISO3696） 3原理 以甲醇为溶剂，超声萃取皮革试样中的异噻唑啉酮，提取液用HPLC-DAD测定和确证，外标法 定量。 4 试剂和材料 试验用水应符合GB/T6682中规定的二级水要求。 4.1甲醇，色谱级。V 4.22-甲基异噻唑啉-3-酮（CAS号：2682-20-4），标准物质，纯度98.2%以上。 4.35-氯-2-甲基异噻唑啉-3-酮（CAS号：26172-55-4），标准物质，纯度99.0%以上。 4.41,2-苯并异噻唑-3-酮（CAS号：2634-33-4），标准物质，纯度99.5%以上。 4.52-甲基异噻唑啉-3-酮标准储备溶液：准确称取适量的标准物质（4.2），用甲醇溶解后，定容，质量浓 度为1000μg/mL。 4.65-氯-2-甲基异噻唑啉-3-酮标准储备溶液：准确称取适量的标准物质（4.3），用甲醇溶解后，定齐，质 量浓度为1000μg/mL。 4.72-甲基异噻唑啉-3-酮标准储备溶液：准确称取适量的标准物质（4.4），用甲醇溶解后，定容，质量浓 度为1000μg/mL。 4.8异噻唑啉酮混合标准工作溶液：分别移取一定体积的3种异噻唑啉酮的标准储备溶液（4.5～4.7）， 置于棕色容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，配成0.5μg/mL10μg/mL的标准工作溶液。 5仪器和设备 5.1管状硬质玻璃提取器，60mL，带旋盖，配聚四氟乙烯垫片。 1 SN/T 4448—2016 5.2液相色谱仪，配有二极管阵列检测器（HPLC-DAD)。 5.3分析天平，感量为0.1mg。 5.4超声波清洗器，工作频率40kHz，超声功率500W。 5.5有机滤膜，孔径0.45μm。 6试样制备 取有代表性试样，剪成约4mm×4mm的小片，混合均匀。 7分析步骤 7.1样品提取 称取剪碎的试样1.0g（精确至0.1mg）置于玻璃提取器（5.1)中，加人10mL甲醇，旋盖，室温下将 提取器置于超声波清洗器（5.4)中提取30min，滤膜（5.5）过滤，滤液待用。 7.2 HPLC-DAD分析条件 由于测试结果与使用的仪器和条件有关，因此不可能给出色谱分析的普遍参数。采用下列参数已 被证明对测试是合适的： a) 色谱柱：ZORBAXEclipseXDBCis，4.6mmX250mmX5μm，或相当者； b) 柱温：40℃； c) 检测波长：200nm~400nm； 定量波长：275nm，318nm； e) 流动相A（甲醇）：流动相B水）为35：65； 流速：0.8mL/min; g) 进样量：15μL。 7.3HPLC-DAD测定 分别取15uL试样和标准工作液进行HPLC-DAD分析，通过比较试样和标准溶液在规定的检测 波长处色谱峰的保留时间（参见附录A）以及紫外可见光谱图（参见附录B)进行定性，以外标法定量。 准信息服 同时进行空白试验。 8结果计算 8.1 线性校准方程的建立 根据异噻唑啉酮标准工作溶液及相应色谱峰面积，通过最小二乘法拟合得到线性校准方程式（1）， 其线性相关系数应大于0.995。 c, =K,XA, +b; .....(1 ) 式中： 提取液中异噻唑啉酮的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）； K，一一异噻唑啉酮校准曲线斜率； A, 一提取液中异噻唑啉酮的色谱响应面积； 一异噻唑啉酮标准曲线截距。 8.2试样中异噻唑啉酮含量按式（2)进行计算。 2