ICS 65.020.01 CCSB15 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T 3939.4—2021 甘薯主要病害抗性鉴定技术规程 第4部分：蔓割病 Technical code of practice for identification of resistance to sweetpotato diseases- Part 4:Sweetpotato fusarium wilt 行业标准信息服务平台 2021-11-09发布 2022-05-01实施 中华人民共和国农业农村部发布 NY/T 3939.4—2021 公共服育 食典通 本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化义件的结构和起草规则》的规定 起草。 NY/T3939—2021《甘薯主要病害抗性鉴定技术规程》分为6个部分： 第1部分：黑斑病； 第2部分：茎线虫病； 第3部分：根腐病； 第4部分：蔓割病； 第5部分：薯瘟病； 第6部分：疮痴病。 本文件是NY/T3939—2021《甘薯主要病害抗性鉴定技术规程》的第4部分。 本文件由农业农村部种植业管理司提出并归口。 物研究所。 本文件主要起草人：谢逸萍、邱思鑫、刘中华、张鸿、欧建龙、黄立飞、孙厚俊、张成玲、杨冬静、马居奎、 蒋玉峰、谢睿寰、唐伟。 行业标准信息服务平台 I NY/T3939.4—2021 甘薯主要病害抗性鉴定技术规程 第4部分：蔓割病 1范围 本文件规定了甘薯蔓割病抗性鉴定的鉴定方法、病情调查与数据计算、抗病性评价、有效性判断。 本文件适用于甘薯蔓割病抗性鉴定 2规范性引用文件 其中，注日期的引用文 TANDA 本文件。 ING GB4406 种薯 3术语和定义 件 3. 1 甘薯蔓割病 sweetpotato fusarium wilt 由尖孢镰刀菌 甘专 E型Fusariumorysporum tatas lanse en引起，造成 叶片发黄，茎基部 工 烂状，维管束呈褐色斑点症状 3. 2 抗病性 植物体所具有的 御病原体致病作用的可遗 3. 3 病情级别 diseasa 人为量化植物个体成群休受病程度的数值描 3. 4 病情指数diseaseindex 通过对植株个体发病程度（病情级别）数的计算所获得的样体发病程度的数值化描述。 4！ 鉴定方法 4.1鉴定材料准备 将符合GB4406要求的种薯在无病苗床排种育苗，薯苗离苗床土层5cm剪下，长度20cm～25cm。 每品种剪取3组薯苗，每组10株，挂上名称、编号、试验重复的标牌，备用。 4.2培养基制备 4.2.1PDA培养基 马铃薯200g，脱皮洗净加800mL蒸馏水煮开10min后纱布过滤弃残渣，加蔗糖20g.琼脂16g。 蒸馏水定容至1000ml.pH7.2.121℃高压灭菌25min。 4.2.2麦粒培养基 每500g麦粒加1000mL自来水煮开5min后倒掉水，将麦粒装瓶后121℃高压灭菌25min后取出 备用。 1 NY/T3939.4—2021 4.3病原菌分离及保存 采集具有甘薯蔓割病典型症状的茎蔓，将病部（褐色维管束处）茎段用75%酒精消毒3min，2%次氯 酸钠消毒5min，无菌水清洗两遍，在超净工作台中将发病部位1cm长维管束挑出至含100μg/mL链霉 素的PDA培养基上面，28℃培养48h，有菌丝产生后转移培养至孢子形成，单孢纯化，回接至对照品种出 现典型蔓割病症状，复壮至强致病力，保存备用。病原菌复壮及保存方法见附录A。 4.4接种液制备 将4.3纯化好的病原菌于麦粒培养基上培养后，按照体积比1：1加人无菌水放入无菌容器中， 浸泡并捣碎麦粒配成孢子悬浮液，用双层纱布过滤，4000r/min离心10min，无菌水稀释，制备成 5X10%CFU/mL的菌液，备用。 4.5接种及栽种管理 4.5.1接种 将待鉴定薯苗基部新鲜剪口浸入制备好的蔓割病菌孢子悬浮液中3cm约20min，取出晾干后栽入 鉴定励中。 4.5.2栽种管理 起垄栽种，挚距75cm~85cm，株距20cm~25cm。设3次重复，随机区组排列，每处理栽1垄，10 株。同时栽种抗病对照和感病照，种植未接种病原孢子的感病品种为空白对照。裁种后正常管理，保持土 壤湿度在90%以上。 5病情调查与数据计算 5.1病情调查 栽后约30d逐株调查甘薯的根部和茎部发病情况，剖茎检查维管束变褐程度。病情分级标准如下： 0级：日测无症状； 1级：地上部生长正常，茎基部维管束变褐在小于植株长度的25%； -3级：地上部基本正常，茎基部维管束变褐在植株长度的25%~50%； -5级：茎基部叶片变黄，维管束变褐在50%以上； -7级：植株叶片多数变黄枯死，茎部维管束变褐扩展及顶芽； -9级：全株枯死。 5.2数据计算 依据病情调查情况，按公式（1)计算病情指数，精确至0.1。 (N Xi) DI= 全信息服务平台 X100 (1) MX9 式中： DI 病情指数； 第i病害级别的株数； 病情级别值； 6抗病性评价 根据病情指数评价甘薯蔓割病抗病性，将甘薯品种划分为高抗、抗病、中抗、感病、高感5个抗性类型， 评定标准如下： 高抗：病情指数≤20.0； 抗病：20.0<病情指数≤40.0； 中抗：40.0<病情指数≤60.0； 感病：60.0<病情指数≤80.0； 2